Application of analyte-mediated enzyme-activating signal amplification system in elisa for determining low concentrations of bioanalytes

О. Ю. Галкін, Ю. В. Горшунов

Abstract


In this work were conducted development and characterization of enzyme immunoassay (ELISA) to determine total IgE-antibodies using tyramine-biotin reagent (TBR). It was shown that the use of ELISA modifications with avidin-biotin amplification (ABA) and TBR significantly extend application analysis dose human IgE below 50 IU/ml. For the purposes of clinical diagnosis was the most appropriate ELISA with ABA, however, when there is the need to define micro-concentrations of analyte (10-10 g), the only possible option is ELISA with TBR. When used ELISA reagent concentration dynamic range for all modifications made three orders.

Keywords


ELISA; tyramine-biotin reagent; avidin-biotin amplification; IgE

References


Catalyzed reporter deposition, a novel method of signal amplification. Application to immunoassays / [Bobrow M. N., Harris T. D., Shaughnessy K. J., Litt G. J.] // J. Immunol. Meth. – 1989. – Vol. 125(1-2). – P. 279-285.

The use of catalyzed reporter deposition as a means of signal amplification in a variety of formats / [Bobrow M. N., Litt G. J., Shaughnessy K. J. et al.] // J. Immunol. Meth. – 1992. – Vol. 150(1-2). – P. 145-149.

Van Gijlswijk R. Fluorochrome-labeled tyramides: use in immunocytochemistry and fluorescence in situ hybridization / Van Gijlswijk R., Zijlmans H., Wiegant J. // J. Histochem. Cytochem. – 1997. – Vol. 45(3). – P. 375.

Tijssen P. Practice and theory of enzyme immunoassays / P. Tijssen // Lab. Techiques in Biochem. and Molecular Biology. – 1985. – 15. – 674 p.

Goding J. Monoclonal antibodies. Principles and practice / J. Goding. – San Diego: Academic press, 1996. – 492 p.

Простые иммунохимические методы определения пестицидов на основе биотин-стрептавидиновой системы / [Павлова И. С., Любавина И. А., Жердев А. В., Зинченко А. А.] // Биоорг. химия. – 1997. – Т. 23, № 10. – С. 832-383.

Galkin A.Yu. Elaboration of immunoenzymatic test-kit for total human IgE assay and investigation of its analytical properties / A. Yu. Galkin, A. M. Dugan // Int. J. Immunol. – 2013. – Vol. 1(1). – Р. 1-6.

Розробка і порівняльна характеристика різних модифікацій імуноферментного аналізу для визначення специфічних IgE-антитіл / [Галкін О. Ю., Михальчук М. В., Казмірчук В. Є., Гурженко Ю. М.] // Вісник Київського національного університеті імені Тараса Шевченка. Серія: Біологія. – 2014. – №1(66). – С.15-21.

Отримання та вивчення властивостей нових моноклональних антитіл до IgE людини / [Галкін О. Ю., Савченко А. А., Нікітіна К. І., Дуган О. М.] // Укр. біохім. жур. – 2013. – Т. 85, № 8. – С. 81-87.


Refbacks

  • There are currently no refbacks.

Comments on this article

View all comments